Detection of tumors with fluoromarker-releasing bacteria

Combining the specificity of tumor-targeting bacteria with the sensitivity of biomarker detection would create a screening method able to detect small tumors and metastases. To create this system, we genetically modified an attenuated strain of Salmonella enterica to release a recombinant fluorescent biomarker (or fluoromarker). Salmonella expressing ZsGreen were intravenously administered to tumor-bearing mice and fluoromarker production was induced after 48 hr. The quantities and locations of bacteria and ZsGreen were measured in tumors, livers and spleens by immunofluorescence, and the plasma concentration of ZsGreen was measured using single-layer ELISA. In the plasma, the ZsGreen concentration was in the range of 0.5–1.5 ng/ml and was dependent on tumor mass (with a proportion of 0.81 ± 0.32 ng·ml⁻¹·g⁻¹). No adverse reaction to ZsGreen or bacteria was observed in any mice. ZsGreen was released at an average rate of 4.3 fg·CFU⁻¹·hr⁻¹ and cleared from the plasma with a rate constant of 0.259 hr⁻¹. ZsGreen production was highest in viable tissue (7.6 fg·CFU⁻¹·hr⁻¹) and lowest in necrotic tissue (0.47 fg·CFU⁻¹·hr⁻¹). The mass transfer rate constant from tumor to blood was 0.0125 hr⁻¹. Based on these measurements, this system has the capability to detect tumors as small as 0.12 g. These results demonstrate four essential mechanisms of this method: (i) preferential tumor colonization by bacteria, (ii) fluoromarker release in vivo, (iii) fluoromarker transport through tumor tissue and (iv) slow enough systemic clearance to enable measurement. This bacteria-based blood test would be minimally invasive and has the potential to identify previously undetectable microscopic tumors.     

清热活血方佐治支气管扩张症急性加重期临床观察

目的:探讨中药清热活血方佐治支气管扩张症急性加重期的临床疗效。方法:选取2016年10月至2018年10月广州中医药大学第二临床医学院收治的支气管扩张症急性加重期患者116例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组58例。对照组给予排痰、抗感染等西医常规治疗;观察组在对照组治疗的基础上给予中药清热活血方治疗,疗程均为2周。比较2组治疗前后中医证候评分、动脉血气分析指标、血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平,并比较2组治疗总有效率。结果:治疗后观察组咳嗽痰多、痰中带血、发热口渴、胸闷气急、舌苔、脉象各项评分均低于对照组(P<0.01),血气分析指标中氧分压(PaO 2)、血氧饱和度(SaO 2)高于对照组(P<0.01),二氧化碳分压(PaCO 2)低于对照组(P<0.01),血清MMP-9水平低于对照组(P<0.01),TIMP-1水平高于对照组(P<0.01),治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。结论:中药清热活血方佐治支气管扩张症急性加重期,可有效缓解症状,改善动脉血气指标,调节MMP-9、TIMP-1平衡,提高临床疗效。     

《备急千金要方》腑实热病证组方配伍用药特色初探

《备急千金要方》集中体现了唐代初期以前的医学成就,具有很高的临床价值,首开脏腑论治先河,脏腑卷下分列虚实,提示辨证法门,方药罗列其中,以方示法。《备急千金要方》腑实热内容,以寸口脉位定脏腑,以阳实脉象示病性,以关联经脉及脏腑病症为提纲,以热邪充斥,经腑、脏腑同病为病理特征。依据各腑实热的病理特点,结合《千金翼方》本草理论,分析其组方用药特色,随腑实热病性不同有清养、清泻、清宣、清解等功效,视其兼证而用安神、泻下、利水、行气、凉血,解毒散结等药物。其组方配伍思路既可以针对现代疾病如不寐、头痛、乳痈、口疮、便秘、癃闭等提供借鉴,也可为临床新药开发提供方源和创新思路。     

新型冠状病毒(COVID-19)感染性肺炎现代中医诊疗建议方案与探讨

自2019年12月以来,以我国湖北武汉地区为中心,以人群集散辐射传播为特点,全国各地病例陆续出现增加。疫情发源地罹患患者早期以身热不扬、干咳气促、身楚乏力为主要症状,以脉濡缓、舌苔厚腻、胸部X线检查显示炎性反应性改变为特征的新型冠状病毒(COVID-19)感染性肺炎为主的新型传染病。疫情传入地的患者早期症状由于地域的不同,有所差异。各地传统中医、现代医学先后集体或个人出台了相关诊疗方法和建议方案。作为现代中医,按照习近平主席:“遵循中医发展规律,传承精华,守正创新”和“中西并重”的指示精神。为规范这一新型传染病“瘟疫”的认知和诊疗,综合相关资料,根据疫情演变规律,结合个人经验与体会,特此探讨COVID-19感染性肺炎的诊疗建议方案。     

柴葛芩连汤联合常规治疗对湿热闭肺型小儿支气管肺炎患者的临床疗效

目的考察柴葛芩连汤联合常规治疗对湿热闭肺型小儿支气管肺炎患者的临床疗效。方法 137例患者随机分为对照组(68例)和观察组(69例),对照组给予常规治疗(吸氧、布洛芬、头孢美唑钠、喜炎平注射液),观察组在对照组基础上加用柴葛芩连汤,疗程10 d。检测临床疗效、恢复情况、血清炎症因子(CRP、IL-6、IL-8、TNF-α)、中医证候评分变化。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05),恢复情况(除X线全胸片消失时间外)更明显(P<0.05)。治疗后,2组炎症因子水平、中医证候评分降低(P<0.05),以观察组更明显(P<0.05)。结论柴葛芩连汤可缓解湿热闭肺型小儿支气管肺炎患者症状,其机制可能与下调血清CRP、IL-6、IL-8、TNF-α水平有关。     

苇茎汤合麻杏石甘汤加减联合半量激素治疗儿童毒热闭肺证难治性肺炎支原体肺炎

目的:观察苇茎汤合麻杏石甘汤加减联合半量激素治疗儿童毒热闭肺型难治性肺炎支原体肺炎的临床疗效。方法:120例患儿随机分为对照组和观察组,各60例。在基础治疗基础上,对照组给予连花清瘟颗粒+甲强尼龙(每次10 mg·kg-1,2次/日),观察组给予苇茎汤合麻杏石甘汤加减+甲强尼龙(每次10 mg·kg-1,1次/日),疗程均为14 d。观察两组治疗前后肺功能指标[最大通气量(MVV),呼气达峰时间(TPTEF),第1秒用力呼气容积(FEV1),呼气达峰容积(VPTEF)],血浆心肌酶谱[肌酸激酶(CK),肌酸激酶同工酶(CKMB),乳酸脱氢酶(LDH),胫丁酸脱氢酶(HBDH)],免疫功能[免疫球蛋白G(IgG),免疫球蛋白M(IgM),红细胞免疫复合物(RBC-ICR),红细胞C3b受体(RBC-C3bR)],炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α),γ-干扰素(IFN-γ),白细胞介素-13(IL-13),白细胞介素-17A(IL-17A)],临床疗效和不良反应。结果:研究期间脱落4例。观察组总有效率96.6%(57/59),高于对照组的84.2%(48/57)(P<0.05)。与对照组治疗后比较,观察组MVV,TPTEF,FEV1,VPTEF,RBC-C3bR,IL-13升高(P<0.05);CK,CKMB,LDH,HBDH,IgG,IgM,RBC-ICR,TNF-α,IFN-γ和IL-17A降低(P<0.05)。观察组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论:苇茎汤合麻杏石甘汤加减联合半量激素可明显改善毒热闭肺型难治性肺炎支原体肺炎患儿的肺功能,心肌酶谱,免疫功能和炎性因子水平,不良反应发生率低。     

五虎汤合清金降火汤加减治疗小儿社区获得性肺炎痰热闭肺证及其机制

目的:观察五虎汤合清金降火汤加减治疗小儿社区获得性肺炎(CAP)痰热闭肺证的临床疗效及对炎症因子的影响。方法:将140例CAP患儿随机按数字表法分为对照组69例和观察组71例。两组患儿给予抗感染、退热、祛痰、平喘及呼吸支持等治疗。对照组口服羚羊清肺颗粒,1 g/次,3次/d;观察组内服五虎汤合清金降火汤加减,1剂/d。两组疗程均为连续治疗7 d。监测体温,记录退热起效时间和完全退热时间和治疗后7 d的完全退热率;记录咳嗽、咯痰缓解时间及消失时间,记录肺部湿啰音消失时间;记录治疗失败情况;进行治疗前后痰热闭肺证评分;检测治疗前后血清超敏C反应蛋白(hs-CRP),降钙素原(PCT),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果:采用秩和检验分析两组患儿的临床疾病疗效,观察组优于对照组(Z=2. 106,P0. 05);采用秩和检验分析两组患儿中医证候疗效,观察组优于对照组(Z=2. 119,P0. 05);观察组患儿的退热起效和完全退热时间均短于对照组(P0. 01);观察组患儿咳嗽、咯痰缓解时间及消失时间和肺部湿啰音消失时间均短于对照组(P0. 01);观察组治疗后7 d的完全退热率96. 92%(63/65),高于对照组的82. 81%(53/64)(χ~2=7. 085,P0. 01);观察组患儿治疗失败率为9. 23%(6/65),低于对照组的23. 44%(15/64)(χ~2=4. 775,P0. 05);观察组痰热闭肺证各主要症状、体征评分、次要症状评分和总积分均低于对照组(P0. 01);观察组hs-CRP,PCT,TNF-α和IL-6水平均明显低于对照组(P0. 01)。结论:在常规抗感染等综合治疗的基础上,给予五虎汤合清金降火汤加减内服治疗CAP(痰热闭肺证)患儿,可进一步控制临床症状,具有起效快、症状消退快、病程短的优点,并可减轻炎症反应,控制疾病进展,完全退热率,提高临床疾病疗效和中医证候的疗效。     

从免疫炎性损伤角度探讨5种清热解毒药物抗流感的机制及其临床意义

目的探讨黄芩、板蓝根、白头翁、虎杖、白花蛇舌草5种清热解毒代表药物抗流感病毒感染所致免疫炎性损伤的作用机制。方法在流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株FM1感染小鼠后的不同时相(初期、极期、后期),采用ELISA法,动态观察清热解毒代表药物对小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)5种炎性细胞因子含量的影响。结果黄芩在感染后第3日可显著降低血清TNF-α、IL-1、IL-6含量,并于感染后各时相均可增加IFN-γ含量,感染后第1~5日增加IL-10含量。板蓝根在感染后第3日能显著降低血清TNF-α含量,第3~5日降低IL-6含量,并在感染后第1天升高IL-10含量,在感染后第3~5日能升高IFN-γ含量。白头翁在感染后第3日能明显降低血清TNF-α、IL-1、IL-6含量,同时显著升高IL-10含量。虎杖在感染后第1日可显著升高血清IL-10含量,在感染后第5日升高IFN-γ含量。白花蛇舌草在感染后第3日降低血清IL-6含量,在感染后第5日升高IFN-γ含量。结论黄芩的抗流感作用主要表现在流感病毒感染引起的急性外感热病的极期;板蓝根在流感病毒感染的各个时相均有一定的治疗作用;白头翁在流感病毒感染的极期可抑制炎性损伤;虎杖在感染流感病毒的初期与后期均可减少促炎性细胞因子的分泌;白花蛇舌草在流感病毒感染的极期及后期均可起到一定的抗免疫炎性损伤。各药物均具有抑制炎性损伤、防止多脏器功能衰竭、防止休克、退热和抑制促炎性细胞因子的分泌,调节机体免疫,从而减轻炎症反应的作用。     

运用六经辨证治疗子嗽探析

妊娠期间,咳嗽不已,称"妊娠咳嗽",亦称"子嗽",孕妇咳嗽日久未见好转,咳嗽胸痛甚则咳而呕吐,或咳嗽剧烈或久咳不愈,可损伤胎气,导致堕胎、小产。笔者运用六经辨证治疗外感型中表寒里热证子嗽,认为此类患者病在太阳阳明,属于寒热错杂之表寒里热,采用《伤寒论》中方证麻杏甘石汤合止嗽散,使热从外泄,宣发卫气,散寒不助热、解表不伤正,故辨证论治取得了显著的疗效。同时子嗽治疗还需注意健脾固肾安胎,应将顾护胎元贯穿治疗妊娠咳嗽的始终。     

加味黄连解毒汤灌肠辅助治疗重症肺炎合并胃肠功能障碍临床研究

目的:观察加味黄连解毒汤灌肠辅助治疗重症肺炎痰热壅肺证合并胃肠功能障碍的临床疗效。方法:选取64例重症肺炎痰热壅肺证合并胃肠功能障碍患者,依据不同的治疗方法分为治疗组和对照组,每组32例。对照组给予抗菌药、胃肠功能保护药、机械通气等对症治疗,治疗组在对照组基础上联合加味黄连解毒汤灌肠治疗。比较2组临床疗效、治疗前后中医证候积分及血清降钙素原(PCT)水平,记录不良反应发生情况。结果:治疗组总有效率93.75%,高于对照组的71.88%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组中医证候积分均较治疗前降低,治疗组中医证候积分比对照组下降更明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗3天与治疗7天,治疗组PCT水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,治疗组发生不良反应5例,对照组发生不良反应4例,未经处理均自行缓解。结论:加味黄连解毒汤灌肠辅助治疗重症肺炎痰热壅肺证合并胃肠功能障碍,可以有效减轻患者的临床症状,改善胃肠功能,抑制炎症反应。